Che cos'è la precipitazione del DNA?
La precipitazione dell'acido desossiribonucleico (DNA) è un passo fondamentale nell'isolamento e nella purificazione del materiale genetico nella scienza. Generalmente, un campione di tessuto biologico contiene DNA o RNA insieme al resto del corpo dell'organismo. Per testare il DNA, uno scienziato deve separare il DNA da tutte le altre sostanze. La precipitazione del DNA si riferisce specificamente a una fase che prevede la separazione del DNA disciolto dal liquido in cui è disciolto. I metodi comuni di precipitazione del DNA includono l'aggiunta di etanolo, ispropanolo o glicogeno al liquido, che fa solidificare il DNA in grumi e cadere nel parte inferiore del campione liquido.
I primi passi nella purificazione del DNA da un campione possono essere semplici come frantumare le foglie in una ciotola per abbattere parte della struttura. Quindi il pastone può essere scomposto con sostanze chimiche o enzimi che lasciano intatto il DNA. Comunemente, i genetisti usano una centrifuga per aiutare a dividere i diversi componenti di un campione. Questa è una macchina che gira un campione in modo che il componente più pesante affonda sul fondo e il più leggero sale verso l'alto.
Rimuovendo vari componenti indesiderati, il genetista viene comunemente lasciato con un liquido chiaro che contiene il materiale genetico. Quindi deve estrarre il DNA disciolto in quel liquido e scartare il liquido e le altre sostanze nel liquido. La precipitazione del DNA è il modo in cui ciò è ottenuto. Molto spesso, lo scienziato deve aggiungere una sostanza chimica al liquido per eseguire la precipitazione del DNA.
L'etanolo o l'isopropanolo, che sono entrambe le forme di alcol e rientrano nel gruppo solvente di sostanze chimiche, sono le sostanze chimiche più comuni utilizzate per la precipitazione del DNA. Il glicogeno è un'altra sostanza che può far precipitare il DNA, ma è meno comunemente usato, oltre a precipitare basse concentrazioni di materiale genetico. Quando queste sostanze chimiche si mescolano con il DNA disciolto, la loro chimica permette loro di alterare il modo in cui il DNA si adatta al suo ambiente. Mentre prima, il DNA si mescolava facilmente con il liquido, dopo l'aggiunta chimica, smette di legarsi al liquido e si forma invece in un solido.
Questo solido è normalmente biancastro e si raggruppa insieme. Poiché parte del solido si trova ancora in piccole particelle, tuttavia, lo scienziato posiziona di solito il campione in una centrifuga per far ruotare tutti i solidi in un pellet sul fondo della provetta. Questa è la forma purificata del DNA originariamente presente nel campione, utile per i test. Generalmente, il liquido in cui è sospeso il pellet viene rimosso dal tubo e il pellet può anche essere essiccato per consentire alle sostanze chimiche di evaporare, al fine di rendere il pellet il più puro possibile.