O que é isolamento total de RNA?
O isolamento total do ácido ribonucleico (RNA) é uma técnica de laboratório usada para extrair todo o RNA celular de uma amostra de tecido. Isso difere de outros métodos de processamento que selecionam seletivamente certos tipos de RNA. Um pesquisador pode, por exemplo, querer inspecionar o RNA mensageiro (mRNA) e trabalhar com uma amostra para extrair apenas esse material genético. Existem vários protocolos de laboratório disponíveis para o isolamento total do RNA, usando uma variedade de produtos fabricados por fornecedores científicos.
Pode haver várias vantagens em coletar todo o RNA celular de uma amostra de tecido. Pode produzir informações mais puras e utilizáveis. A técnica também pode permitir que os pesquisadores verifiquem a degradação que pode causar problemas com os experimentos. Se a amostra for de baixa qualidade, o pesquisador poderá extrair o RNA novamente para obter uma coleção mais limpa e útil de RNA. Isso pode ser importante para muitos tipos de pesquisa, onde o RNA ruim no início causa problemas com experimentos posteriores.
Técnicas para o isolamento total do RNA podem envolver uma variedade de agentes químicos. Alguns focam no uso de produtos químicos não tóxicos para reduzir o risco de danos à amostra. Tais produtos químicos também limitam a poluição a jusante do RNA e são mais seguros para os trabalhadores de laboratório. Os laboratórios tendem a selecionar um protocolo e produto químico específico a ser recomendado a todos os funcionários e incluem uma descrição detalhada do procedimento total de isolamento de RNA em seus manuais. Isso garante consistência no processamento de RNA nas instalações para produzir resultados mais estáveis e úteis.
O processo começa com a preparação de uma amostra de tecido, que pode variar em tamanho, para prepará-lo para o tratamento de quais reagentes químicos extraem o RNA total. Os técnicos consultam o manual do laboratório para determinar como manipular a amostra e tratá-la para isolar o RNA. Eles podem usar ferramentas como placas de eletroforese para verificar a qualidade da amostra, procurando sinais de degradação que possam indicar um problema no processo total de isolamento do RNA.
Os pesquisadores podem realizar seu próprio isolamento total do RNA ou delegar essa tarefa a um assistente de laboratório, estudante de graduação ou técnico de laboratório similar. Também é possível contratar isolamento para outras instalações de laboratório. Às vezes, isso pode ser necessário para proteger a integridade de um experimento, usando terceiros para gerar resultados verificáveis e repetíveis. Em qualquer artigo científico baseado em pesquisa com o RNA isolado, o pesquisador precisa discutir o método usado para o isolamento e quem executou o trabalho.