Jaké jsou kroky v postupu ELISA?

Postup ELISA začíná na klinice, přičemž pacientovi je odebrán vzorek krve. Potom se provede řada kroků za použití testovací soupravy ELISA v laboratoři. Test detekuje přítomnost protilátek nebo antigenů na onemocnění, jako je HIV, v krvi. Kroky zahrnují přidání různých látek a promytí a výsledky se obecně měří změnou barvy.

Jako diagnostický test se používá enzymatický imunosorbentový test (ELISA), který se také nazývá enzymatický imunotest (EIA). Nejznámější je diagnostický test na HIV. Zkušební destička obvykle sestává z 96 malých jamek, do kterých je imobilizován specifický antigen. Pokud je protilátka přítomna ve vzorku séra, bude se vázat na antigen, což umožní detekci pomocí různých kroků postupu ELISA.

Prvním krokem v postupu ELISA je získání vzorku od pacienta. Děje se to sestrou za sterilních podmínek. Krev se obvykle odebírá ze žíly v paži nebo v ruce. Turniket je umístěn na paži, aby bobtnal žílu a usnadnil postup a kůže byla očištěna tam, kde bude zavedena jehla. Při vpichování jehly může být cítit malé píchnutí a krev bude shromažďována ve sterilní zkumavce.

Po odebrání vzorku krve je přenesen do laboratoře, kde zbytek postupu ELISA provede laboratorní technik. Vzorek krve se nejprve přidá do jamek destičky ELISA. Pokud je přítomna specifická protilátka, váže se na antigen. Destička se poté promyje pufrem, aby se odstranily nenavázané protilátky.

Potom se přidá druhá protilátka, obvykle živočišného původu, která obsahuje enzym, který je k ní připojen, který se bude vázat na komplex protilátka-antigen. Destička se znovu promyje, aby se odstranil přebytek. Enzym je barevně reaktivní, když je substrát přidán na konci postupu ELISA. Výsledkem je měření stupně změny barvy.

Aby nedošlo k falešným výsledkům, je třeba postupovat pečlivě podle postupu ELISA. Ve většině destiček ELISA je zahrnuta pozitivní a negativní kontrola, aby se minimalizovaly takové falešné výsledky. Při testování na HIV bude po pozitivním výsledku obvykle následovat druhý potvrzovací test, často jiného typu, jako je westernový přenos.