ELISAプロトコルとは何ですか？

酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）は、抗原または抗体を検出するために免疫学で使用される一般的な検査です。 抗原は免疫系の反応を引き起こします。つまり、病気を引き起こします。 ELISAは、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、マラリア、コレラ、麻疹、おたふく風邪など、多くの細菌およびウイルス抗原を検出するために使用されます。わずかに異なる ELISAプロトコルを使用して、これらおよび他の多くの病原体に対する抗体を検出できます。 ELISAプロトコルは、特定のELISAを実行するための段階的な手順です。 ELISAは、酵素結合抗体に依存しており、 antiglobulins とも呼ばれます。これらの抗グロブリンに付着したシグナル分子は、目的の抗原または抗体が存在する場合、アッセイ中に色を変化させるために添加された基質を引き起こします。 存在する抗原または抗体の量は量に比例します電子プレートリーダーで測定できる色の変化。

ELISAには3つの主要なタイプがあります。 A 直接 ELISAは通常、抗体ではなく抗原を検出するために使用されます。 これは、酵素結合抗体が目的の抗原に直接結合するため、最も単純なELISAプロトコルです。 次に、基質を加えて存在する抗原の量を決定します。

an 間接 elisaは抗体を検出するために使用されますが、抗原を検出するために sandwich elisaと呼ばれる別のタイプの間接ELISAを使用できます。 サンドイッチELISAプロトコルには、所望の抗原に結合するために、捕獲および検出抗体と呼ばれる2つの抗体が必要です。 抗グロブリンが添加され、検出抗体に結合し、基質が添加されます。 間接ELISAは同様のプロトコルに従いますが、Dを検出するために捕獲抗体ではなく捕捉抗原を使用します耐用性抗体。

競争力のある ELISAは、非常に敏感なアッセイであるため、低濃度で存在する抗原を検出するためによく使用されます。 他のELISAプロトコルとは対照的に、競合ELISAは抗体の代わりに酵素結合抗原とわずかに異なる定量化方法を使用します。その中で、検出される抗原を含むサンプルと酵素結合抗原は両方とも抗体に添加され、2つの抗原は抗体結合部位を競います。 基質が追加されると、色の変化が大きくなり、結合した酵素結合抗原の比率が高くなり、サンプル抗原が結合されます。 これは、サンプル抗原の低濃度でより高い色の変化が検出されることを意味します。これがこの方法を非常に敏感にしています。