ELISAプロトコルとは何ですか？

酵素結合免疫吸着検定法（ELISA）は、免疫学で抗原または抗体を検出するために使用される一般的な検査です。 抗原は免疫系の反応を引き起こします。言い換えると、抗原は病気を引き起こします。 ELISAは、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、マラリア、コレラ、はしか、おたふく風邪など、多くの細菌およびウイルス抗原の検出に使用されます。 わずかに異なるELISAプロトコルを使用して、これらおよび他の多くの病原体に対する抗体を検出できます。 ELISAプロトコルは、特定のELISAを実行するための段階的な手順です。

ELISAプロトコルは、実行されるELISAのタイプに応じてわずかに異なりますが、基本的な概念はすべてについて同じです。 ELISAは、 抗グロブリンとも呼ばれる酵素結合抗体に依存しています。 目的の抗原または抗体が存在する場合、これらの抗グロブリンに付着したシグナル分子により、アッセイ中に追加された基質の色が変化します。 存在する抗原または抗体の量は、電子プレートリーダーで測定できる色の変化の量に比例します。

ELISAには3つの主要なタイプがあります。 通常、抗体ではなく抗原を検出するために直接 ELISAが使用されます。 酵素結合抗体が目的の抗原に直接結合するため、これは最も単純なELISAプロトコルです。 次に、基質を加えて、存在する抗原の量を決定します。

間接 ELISAは抗体の検出に使用されますが、 サンドイッチ ELISAと呼ばれる別のタイプの間接ELISAは抗原の検出に使用できます。 サンドイッチELISAプロトコルでは、目的の抗原に結合するために、捕捉抗体と検出抗体と呼ばれる2つの抗体が必要です。 検出抗体に結合する抗グロブリンが追加され、基質が追加されます。 間接ELISAも同様のプロトコルに従いますが、目的の抗体を検出するために、捕獲抗体ではなく捕獲抗原を使用します。

競合 ELISAは、非常に感度の高いアッセイであるため、低濃度で存在する抗原の検出によく使用されます。 他のELISAプロトコルとは対照的に、競合ELISAでは、抗体の代わりに酵素結合抗原を使用し、わずかに異なる定量化方法を使用します。 その中で、検出される抗原と酵素結合抗原を含むサンプルが両方とも抗体に加えられ、2つの抗原は抗体結合部位をめぐって競合します。 基質が添加されると、色の変化が大きくなり、結合したサンプル抗原に対する結合した酵素結合抗原の比率が高くなります。 これは、サンプル抗原の濃度が低いと、より高い色の変化が検出されることを意味します。これが、この方法の感度を高めるものです。